細胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)(產(chǎn)品)的基礎(chǔ)。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn)。
由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁,但成分不同,且同類細胞結(jié)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不同,因此其細胞壁的堅固程度不同,總體呈現(xiàn)遞增態(tài)勢。動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來破膜,達到提取產(chǎn)物的目的。
化學(xué)試劑法
• 方法:某些有機溶劑(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學(xué)藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)含物有選擇地滲透出來。SDS(十二烷基磺酸鈉)是典型的陰離子表面活性劑
• 特點:提取核酸時,常用此法破碎細胞。
• 存在的問題:
a) 時間長,效率低;
b) 化學(xué)試劑毒性較強,同時對產(chǎn)物也有毒害作用